无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间（与外间隔离），专辟于微生物实验室内，可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间，错开门向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。在获得了无菌环境和无菌材料后，只有保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究。

无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照30分钟。

供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75%的酒精棉球外表面。

每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。

吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。

接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧，待冷却后，方可接种培养物。

带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的桶内，24小时后取出冲洗。

凡带有活菌的物品，必须经后，才能在水下冲洗，严禁污染下水道。

无菌室前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用

进入无菌室前，必须于缓冲间更换过的工作服、工作帽及工作鞋。

操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。

吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管，如吸管碰到手及其它未的物体，必须重 新 更 换 ，以 防污染 。

微生物检验用器材及场所必须进行或处理，不同的对象采用不同的处理方法

1． 高压蒸汽: 工作服、口罩、稀释液等，置高压锅内，一般采用121℃半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理

2． 火焰：接种针、接种环等可直接火焰

3． 高温干燥： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃2小时

4． 一 般: 无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行，必须用其他方法进行处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭，工作人员的手也用此法进行

5． 空气的： 开启紫外灯照射30—60分钟 即可。